2. 采样类型
　　利用棉花拭子采泄殖腔（禽）和肛门（猪、牛）作大肠杆菌、沙门氏菌和弯曲杆菌分离，或从孵化后期死亡鸡胚采样分离沙门氏菌。选择奶牛场1-2个，采取新鲜牛奶分离金黄色葡萄球菌，根据养殖场规模，每个场采样30-50份。
　　3. 病原检测种类
　　本年度动物源细菌检测种类包括前几年监测的大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌和本年度新增加的弯曲杆菌。病原菌沙门氏菌和金黄色葡萄球菌可根据各地采样、细菌分离情况任选其一进行监测，也可同时进行。
　　二、认真做好饲料来源和饲料药物添加剂调查、采样前动物抗菌药使用情况调查（预防用药和治疗用药）和样品统计，据实填写采样记录表。
　　三、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和弯曲菌的分离鉴定
　　采用特殊培养基，定向做大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和弯曲菌分离，用生化试验、PCR技术或血清学方法对分离物进行鉴定，尽早进行弯曲杆菌分离鉴定技术培训。本年度要求每个省级实验室分离大肠杆菌不少于300株（鸡场200株，猪场分离100株），沙门氏菌或金黄色葡萄球菌不少于30株，弯曲杆菌不少于50株。中国兽医药品监察所分离大肠杆菌不少于500株（鸡场300株，猪场分离200株），沙门氏菌不少于50株，金葡菌不少于30株，弯曲杆菌不少于100株。将分离到的菌株-20℃以下加甘油保护剂冷冻保存或其它合适方法保存。
　　四、耐药性测定
　　用微量肉汤稀释法（附件3），测定肠道菌、金黄色葡萄球菌对临床13种常用抗菌药物的耐药性（注意肠道菌、金黄色葡萄球菌的测试药物各有不同），弯曲杆菌统一送中国兽医药品监察所指导耐药性检测。将测定结果正确填入耐药性检测结果统计表（附件6）。药物种类、判断标准及质控菌株的质控范围见附件3，试验用标准品、质控菌株由中国兽医药品监察所统一供应。
　　五、结果报送
　　各地方动物源耐药性监测实验室的采样情况和耐药性检测结果，应填入采样记录表（附件5）和耐药性检测结果登计表（附件6）统一报送中国兽医药品监察所，经统计分析后上报农业部兽医局。
　　结果的上报分电子版和纸质2部分，电子版直接登陆“物源细菌耐药性数据库”上报。纸质结果的上报主要是监测结果总结，要求统一格式、同一内容。主要内容分6部分阐述：（1）本年度任务简述；（2）细菌分离情况；（3）耐药性监测情况；（4）耐药性监测结果分析；（5）存在问题；（6）改进措施和建议。

　　附件3
　　采样记录表

　　采 样 地：___________ _____ 养 殖 场：_________ ____ ___
　　采样时间：__________ ____ 联系人姓名、电话：________________ __

样品来源
□ 猪 日龄 ____□ 鸡 日龄 ____□ 牛 日龄 ____其他________日龄 ____	□ 消化道 □ 呼吸道 □ 泌尿生殖道□ 肝胆 □ 脑 □ 淋巴结 □ 关节 □ 奶样 □ 皮肤 □ 粪便 其他______________
采样动物健康状况 养殖量
□ 健康 □ 发病及症状：____________________________ ________ 。
采样养殖场使用抗菌药情况
饲料来源、添加抗菌药种类		治疗用抗菌药种类
样品分离菌株
□ 大肠杆菌□ 金黄色葡萄球菌□ 链球菌□ 沙门氏菌□ 空肠弯曲杆菌其他__________________		菌株编号：注：菌株编号按照“菌种、来源-采样地、采样年月-菌株编号”的格式进行。如EB-L0701-0001，其中：E（大肠杆菌）B（牛）L（鲁）07（年）01（月）-0001（菌株编号）。菌种简写建议为：E（大肠杆菌）、S（沙门氏菌）、SA（金黄色葡萄球菌）、SC（链球菌）、C（空肠弯曲杆菌）动物简写建议为：B（牛）、P（猪）、C（鸡）

　　注：a为喂奶猪或保温鸡，b为保育猪或生长鸡，c为育成猪或鸡，d为种母猪或产蛋鸡。

　　附件4
　　耐药性检测结果统计表

　　（1）肠道菌耐药性检测结果统计表 养殖场： 检测员： 年 月 日

菌株编号

氨苄西林

阿莫西林/克拉维酸

头孢噻呋

庆大霉素

大观霉素

四环素

多西环素

氟苯尼考

磺胺异恶唑

复方新诺明

恩诺沙星

二氟沙星

多粘菌素E

AM

A/C

EFT

GM

SPT

TE

DO

FFC

SF

SXT

ENR

NOR

PME

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